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國立中興大學 生醫工程研究所 Shu-Ping Lin, Ph.D所指導 萊斯特的 以阻抗法評估細胞貼附之矽奈米線場效電晶體為底之細胞晶片的開發 (2013),提出wf sp900沒反應關鍵因素是什麼,來自於矽奈米線、場效電晶體、阻抗量測、細胞為基底生物感測器、老鼠腎上腺髓質腫瘤細胞、細胞貼附。

而第二篇論文國立陽明大學 傳統醫藥研究所 黃怡超所指導 翁鼎鈞的 蓮子心及其成分亞美罌粟鹼抑制大鼠肝臟纖維化之機轉研究 (2012),提出因為有 亞美罌粟鹼、肝臟纖維化、肝臟星狀細胞、膽管結紮、硫代乙醯胺、腫瘤壊死因子、轉型生長因子、轉錄因子、血管生長素的重點而找出了 wf sp900沒反應的解答。

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以阻抗法評估細胞貼附之矽奈米線場效電晶體為底之細胞晶片的開發

為了解決wf sp900沒反應的問題,作者萊斯特 這樣論述:

矽 奈 米 線 場 效 電 晶 體 (Silicon nanowire field-effect transistors, SiNW FETs)因具有其超靈敏、即時反應、與免標定偵測的特性,已被應用作為以細胞為基底生物感測器(cell-based biosensors, CBBs)中的傳感元件。然而,SiNW-FET-based CBBs 目前僅被應用在生物分子的感測與電生理訊號的紀錄。如果能應用 SiNW-FET-based CBBs 感測器於細胞特性的探究,如:細胞貼附,將有利於一般細胞狀態的偵測。基於細 胞 為 基 底 的 電 阻 抗 感 測 (electric cel

l-substrate impedance sensing,ECIS),本篇研究主要在發展以細胞為基底的矽奈米線場效電晶體阻抗量測系統,以用於偵測細胞貼附的情形。假設細胞貼覆所造成的SiNW FETs 阻抗變化,是來自於貼附細胞的表面帶電性或離子遮蔽效應。單根與並聯式(1, 5, 50 三種並聯式矽奈米線)矽奈米線場效電晶體感測裝置,乃是利用多晶矽 top–down 由上而下方式製備而成。利用表面修飾 poly-D-lysine 於已矽醇功能化的矽奈米線場效電晶體,以誘導貼附未分化老鼠腎上腺髓質腫瘤細胞(PC12)於經修飾感測的裝置上。利用精密 LCR 阻抗量測分析儀量測 SiN

W FETs 源極與汲極間的阻抗變化。利用已培養二維與三維 PC12 細胞於單根 SiNW FETs,進行五天連續隨時間變化的阻抗量測。藉由溶液接地裝置於 p 型與 n 型並聯式SiNW FETs 來改善二維 PC12 細胞的阻抗量測訊號。二維 PC12 細胞於單根 SiNW FETs 上的阻抗量測結果顯示,阻抗值(|Z|)與阻抗相位(θ)隨時間的訊號逐步變化一致,訊號變化在細胞培養第三天達到停滯期。另一方面,三維細胞培養的阻抗參數量測顯示,細胞剛種在元件上時有訊號變化,但隨時間觀察其阻抗值並未有其他進一步變化。此結果顯示,可以利用 SiNW FET 阻抗量測法評估細胞

貼附的情形。此外,主要導致於 SiNW FET 隨時間所產生的阻抗改變是來自於溶液中帶電離子的隔絕。利用溶液接地裝置於 p 型並聯式 SiNW FETs 於阻抗量測訊號系統,結果顯示溶液接地可以有效增進阻抗量測參數隨時間變化的訊號。然而,對於二維 PC12 細胞的貼附觀察並無顯著的訊號變化。可能的原因是藉由參考電極進行溶液接地,使得 SiNW 表面原生的二氧化矽層被破壞而造成量測的缺陷。另一方面,利用 n 型 5根並聯式 SiNW FETs 於二維 PC12 細胞阻抗觀察,結果發現|Z|和 θ隨時間改變的現象與單根 SiNW FETs 相似。1 根並聯式 SiNW

FETs顯示 θ 的改變如同預期會隨時間觀察而改變,但 50 根並聯式 SiNW FETs 並沒有顯示預期中的結果。動態細胞貼附的顯微鏡觀察,驗證活細胞於 n 型並聯式 SiNW FETs 上的阻抗變化。本研究所提之 SiNW FET 於細胞為基底的生物感測技術,可以提供一簡單偵測細胞毒性物質方法,並應用在藥物開發、環境檢測、食品安全以及防護等方面。

蓮子心及其成分亞美罌粟鹼抑制大鼠肝臟纖維化之機轉研究

為了解決wf sp900沒反應的問題,作者翁鼎鈞 這樣論述:

肝臟纖維化是肝臟在損傷時由活化肝臟星狀細胞 (hepatic stellate cells, HSCs)所產生之修補作用,而肝臟星狀細胞活化是可接受許多外生性與內生性的因子刺激,其中內生性因子以腫瘤壊死因子 (TNF-α)、轉型生長因子 (TGF-β1)及與外生性因子脂多糖 (lipopolysaccharide,LPS)在離體實驗中做為星狀細胞活化因子最為常見,甲型平滑肌動蛋白 (α-SMA)且為肝纖維化過程中星狀細胞的活化指標。近來許多研究指出活性氧化物 (reactive oxygen species,ROS)、肝臟持續發炎與肝臟細胞壞死所產生的細胞凋亡小體 (apoptotic bo

dies)可直接活化星狀細胞並引發肝臟纖維化。蓮子心 (Nelumbo nucifera Semen,以下簡稱Nn)主成分之一的亞美罌粟鹼 (armepavine,以下簡稱Arm),已被證實具有良好抗氧化活性、抗發炎活性及肝細胞保護效果。本論文以離體及活體模式探討富含Nn萃取物與Arm對於肝臟星狀細胞活化及大鼠肝臟纖維化的影響,並深入探討其作用機轉。離體試驗以TNF-α、TGF-β1與LPS刺激大鼠肝臟星狀細胞株 (HSC-T6)活化為模式,以Nn萃取物 (0-80 μg/ml)及Arm (0-10 μM)為試驗測試濃度範圍,結果發現Nn萃取物 (80 μg/ml)可抑制TNF-α所引發之肝臟

星狀細胞的細胞內過氧化氫含量與甲型平滑肌動蛋白(alpha-smooth muscleactin,α-SMA)蛋白質表現,細胞內IkBα磷酸化抑制NF-kB活化及α-SMA的蛋白質表現;Nn萃取物 (80 μg/ml) 可顯著減少TGF-β1誘發之Smad 2/3 蛋白質磷酸化並抑制細胞膠原蛋白生成 (collagen deposition)。另外,Nn萃取物的活性成分Arm (0-10 μM)可抑制以TNF-α誘發肝臟星狀細胞的α-SMA與第一型前膠原蛋白 (procollagen type I, Col1α2)蛋白質表現,細胞內過氧化氫的產量,細胞外膠原蛋白堆積,轉錄因子NFkB,有絲分裂

原活化蛋白質激酶 (MAPK)如: p38,ERK1/2及JNK磷酸化,以及轉錄因子NF-kB,JunD及C/EBPβ活化。另外,Arm 在濃度10 µM能顯著地抑制經由TNF-α誘發angiopoietin-1的蛋白質表現 (從337 ± 24%降至242 ± 19%),此蛋白是經內皮細胞分泌能活化星狀細胞。以上實驗結果可得知肝臟星狀細胞的活化是經由多方面轉錄因子與數種分裂原活化蛋白質激酶參與。此外,以LPS誘發的α-SMA蛋白質表現 (174 ± 37%),Arm 在濃度 10 μM也能有抑制的效果 (98 ± 4%)。活體實驗以膽管結紮手術 (bile duct ligation,BDL

)與硫代乙醯胺 (Thioacetamide,TAA) 動物模式誘發大鼠肝臟纖維化來評估Nn萃取物或Arm是否有抑制肝臟纖維化之成效,在TAA和BDL誘發肝纖維化大鼠的實驗中,投與Arm (3 and 10 mg/kg)可降低血漿AST和ALT及降低肝臟膠原蛋白含量,減少IL-6、TGF-β1、TIMP-1、col1α2、iNOS和ICAM-1的mRNA表現,增加metallothionein的基因表現。此外,TAA和BDL大鼠之肝臟組織免疫染色可觀察到α-SMA和NF-κB都表現的細胞 (活化肝臟星狀細胞),大鼠投與Arm可減少活化肝臟星狀細胞的比例。根據以上結果,Nn萃取物及Arm能抑制肝

臟纖維化。細胞及活體實驗結果可提供Nn萃取物與Arm在未來抗肝纖維化藥物開發策略及中醫藥治療肝臟纖維化臨床應用之價值與參考。