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蕈類之健康促進應用探討市售蕈類之抗氧化活性及植物化學素分析

為了解決ug mg換算的問題，作者李秋霖 這樣論述：

第二型糖尿病是全世界常見代謝和內分泌紊亂的慢性病，導致嚴重的健康和經濟問題，由文獻探討糖尿病防治之天然物包含有自由基清除劑、抗氧化物及多醣體等。因此本論文分析16種市售蕈菇之水和酒精萃取物，除分析類三萜、固醇類、生物鹼、及還原糖基，並選擇具抗氧化成分之gallic acid和trolox作為正對照組，進行DPPH自由基清除能力、ABTS‧+自由基清除能力、總多酚含量、總多醣含量測定32種酒及水萃取物(EE及WE)，結果顯示，DPPH自由基清除能力依序為洋菇(EE)、黑木耳(EE)、靈芝成熟子實體(FB)(WE)、雲耳(EE)、茶樹菇(EE)，其半抑制濃度(IC50)分別為279.5、281.

5、308.5、332.8及437.8 μg/ml； gallic acid與trolox分別為5.7及8.2 μg/ml。清除ABTS‧+自由基能力依序為靈芝FB(EE)、茶樹菇(EE)、靈芝幼蕾子實體(BD) (WE)、黑木耳(WE)、靈芝FB (WE)，其半抑制濃度(IC50)分別為213.3、240.9、254.5、261.7、及282.5 μg/ml；gallic acid、trolox分別為4.6及8.5 μg/ml。另外，32種萃取物的總多酚量為相當gallic acid 相當量(GAE) :0.677~ 0.157 μg/mg extracts。總多醣定量以glucose之相當

量(GE) μg，依序為茶樹菇(EE)、杏鮑菇(WE)、猴頭菇(EE)、香菇-ES(EE)、香菇-LF(EE)，當量分別為594.64、554.25、522.1、504.21及459.38 μg GE/mg extracts。綜合以上之結果，茶樹菇(EE)萃取物不但含豐富多醣，同時具有顯著抗氧化能力；另，茶樹菇多醣已被研究證實具有抑制NO和COX-2可被應用於如炎症和癌症之治療。此外，茶樹菇多醣也被發現有顯著抑制STZ誘導的糖尿病小鼠iNOS的表達和血糖水平以及在免疫組織化學分析上顯示有增強了胰臟β細胞對STZ破壞的抗性。因此，茶樹菇無論是在糖尿病營養補充品或新藥之研究上均具有開發之潛力。

探討岩藻寡醣之最適生產條件與生理活性與 經人類腸癌細胞株 Caco-2 吸收及運輸之變化

為了解決ug mg換算的問題，作者張劭強 這樣論述：

本研究目的為探討岩藻寡醣之最適生產條件與相關生理活性之影響，以及於人類結腸癌細胞株 Caco-2 建立之腸道模式下，評估岩藻寡醣於腸道吸收及運輸之變化。自莢托馬尾藻萃取岩藻聚醣，比較程序 a (先以 Fucosidase rfuc I-H 水解 4 hr，失活再加入 MA103 與 MAEF108 粗酵素液水解 24 hr) 與程序 b (同時添加 Fucosidase rfuc I-H、MA103 與 MAEF108 粗酵素液水解 24 hr) 水解岩藻聚醣所得岩藻寡醣 Fuc-S1 與 Fuc-S2 含量，Fuc-S1 含量於 2 程序下分別為 12.6% 與 13.1%，Fuc-S2

含量則分別為 86.2% 與 85.9%；二者程序水解所得寡醣含量相近，經換算 Fuc-S1 與 Fuc-S2 產率為每 100 g 海藻乾重中含 0.70 g 與 4.65 g 岩藻寡醣。由於程序 a 水解較為耗時，因此將以程序 b 做為岩藻寡醣最適生產條件。將酵素水解岩藻聚醣所得之水解液利用超過濾系統區分出小於 3 kDa 分子量之寡醣水解液，經過 Sephadex G-10 膠體過濾層析 (Gel permeation chromartography, GPC) 可獲得岩藻寡醣 Fuc-S1 與 Fuc-S2。分別收集區分液凍乾，利用高效能液相層析儀 (High performance

liquid chromatograph, HPLC) 分析，初步推估 Fuc-S1 為聚合度 DP3，而 Fuc-S2 為 DP2。測定 Fuc-S1 與 Fuc-S2 之硫酸基含量，分別為 0.28 ± 0.01%、0.49 ± 0.01%。利用傅立葉轉換紅外線光譜儀 (Fourier transform infraRed spectroscopy, FT-IR) 分析岩藻寡醣 Fuc-S1 與 Fuc-S2 結構官能基，波長數 3,440 cm-1 有 O-H 官能基，以及在波長數 2,870 cm-1 之 C-H 官能基，另外於波長數 1,248-1,251 cm-1 (S=O) 與

823-829 cm-1 (C-O-S) 之硫酸基團訊號。進一步以 NMR 分析岩藻寡醣 Fuc-S1 與 Fuc-S2 之結構，二者顯示分別在化學位移 1.22 ppm 與 1.28 ppm 之 a-L-Fucp (H6) 之信號，此訊號也確認岩藻寡醣 Fuc-S1 與 Fuc-S2 為 (1→3) 鍵結之岩藻寡醣，而 H1 信號在化學位移 4.33 ppm 與 4.67 ppm，H2-H5 信號在化學位移集中在 3.2-4.0 ppm。抗凝血試驗中之 APTT 於兔血漿及人血漿部分，於濃度 5 mg/mL 與 20 mg/mL 之岩藻寡醣 Fuc-S1 與 Fuc-S2，可較空白組延遲約

22-77 sec 與 11-22 sec，且可降低凝血程度。在 TT 試驗，同樣濃度之 Fuc-S1 與 Fuc-S2 於兔血漿部分可較空白組延遲 11sec 與 22-44 sec。岩藻寡醣 Fuc-S1 與 Fuc-S2 於抗血小板凝集試驗上，濃度 5 mg/mL 與 20 mg/mL 之 Fuc-S1 可較自願者 A (控制組) 分別降低 1.5% 與 3.4%，較自願者 B 降低 0.3% 與 1.0% 之血小板凝集百分比；Fuc-S2 於相同作用濃度下則可較自願者 A 降低 1.4% 與 8.1%，較自願者 B 降低 5.3% 與 9.1% 之血小板凝集百分比。於抗氧化試驗，岩藻寡

醣 Fuc-S1 與 Fuc-S2 分別有 26.47 ± 0.01% 與 9.78 ± 0.01% 清除 DPPH 自由基能力，相當於 31.42 ± 0.02 與 9.84 ± 0.01 ug/mL Trolox。在螯合亞鐵離子能力方面，Fuc-S1 具有 32.53 ± 0.04% 之 螯合能力。在評估抑制人類乳癌細胞 MDA-MB-231 遷移效果之傷口癒合試驗結果顯示，岩藻寡醣 Fuc-S1 與 Fuc-S2 在反應濃度為 0.8 mg/mL 時之 MDA-MB-231 細胞遷移距離分別為 460 m 與 462 m；二者在反應濃度 8 mg/mL 時，岩藻寡醣 Fuc-S1 與

Fuc-S2 之細胞遷移距離分別為 235 m 與 300 m，與控制組 (715 m) 相比呈現的抑制 MDA-MB-231 細胞遷移之效果。評估岩藻寡醣 Fuc-S1 與 Fuc-S2 抑制登革熱病毒第 2 型對宿主細胞吸附反應之影響，經岩藻寡醣 Fuc-S1 以濃度 100 ug/mL 與 1 ug/mL 反應之 BHK-21 細胞存活率分別為 80% 與 78%，而同樣濃度下，岩藻寡醣 Fuc-S2 反應之細胞存活率分別為 86% 與 83%，與控制組 (存活率 74%) 相比具抑制病毒吸附之效果。岩藻寡醣 Fuc-S1 與 Fuc-S2 經 Caco-2 細胞吸收運輸，經 H

PLC 分析岩藻寡醣 Fuc-S1 之上層液中醣含量從 3.71 ± 0.73 mg/mL 降至 3.04 ± 0.34 mg/mL，下層液中含量則從 2.33 ± 0.31 mg/mL 上升至 2.80 ± 0.53 mg/mL，而被 Caco-2 細胞吸收之含量相似約在 4.07 ± 0.60 mg/mL；岩藻寡醣 Fuc-S2 之上層液岩藻寡醣含量自 2.93 ± 0.24 mg/mL 至 2.14 ± 0.86 mg/mL，下層液則從 2.15 ± 0.18 mg/mL 至 3.10 ± 0.27 mg/mL，而被 Caoc-2 細胞吸收之含量約 4.48 ± 0.80 mg/mL。以

反應 90 min 之結果可知，岩藻寡醣 Fuc-S1 其運輸率推估約為 28.1%，Caco-2 細胞吸收率約為 39.0 %；而 Fuc-S2 其運輸率約為 31%，Caco-2 細胞吸收率約為 47.6%。