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魚針草內酯之基因毒理、大鼠28天餵食試驗及小鼠30天免疫毒理安全性評估

為了解決BK-S2的問題，作者陳靖純 這樣論述：

魚針草(Anisomeles indica (L.) Kuntze)主要分布於亞洲南邊之副熱帶地區，其中魚針草內酯(ovatodiolide)為魚針草分離出之雙萜類化合物(diterpenoid)，多篇文獻中已證實魚針草內酯具有降低黑色素生成、抗發炎、延緩氣喘，以及抗腫瘤細胞生長之功效。惟目前尚無毒理學安全性評估相關資料，本研究目的為探討魚針草內酯之使用安全性，供未來動物慢性試驗及人體臨床試驗之劑量參考。本實驗分為三部分進行，第一部分為基因毒理試驗，先以體外試驗(細菌回復突變試驗、活體外哺乳類細胞染色體試驗)檢測魚針草內酯不論有無添加S9肝臟代謝酵素，對於五株沙門氏菌及中國倉鼠卵巢細胞是否具

有回復突變性及致變異性，接著以體內試驗(活體內哺乳類紅血球微核試驗)，單次餵食魚針草內酯(250、500及1000 mg/kg b.w.)，而Cyclophosphamide (60 mg/kg)為陽性對照組則以腹腔注射方式給藥，並於給藥48及72小時後，以眼窩採血方式採集血液樣品，經由血液抹片及染色後，計數網織球及微核數目。第二部分為口服毒性試驗，先進行大鼠單一劑量口服急毒性試驗，以魚針草內酯劑量為1000 mg /kg b. w.，管餵大鼠一次，並連續觀察14天，得知魚針草內酯安全劑量範圍，再進行大鼠28天餵食毒性試驗，本次試驗魚針草內酯採用對照組(5 %DMSO)、低、中及高劑量(10、

25及50 mg/kg b.w.)，並以管餵方式連續餵食大鼠28天。第三部分為小鼠30天免疫毒理試驗，採用ICR品系八週齡雄鼠，分為5組，分別為對照組(5% DMSO)、陽性對照組(cyclophosamide, 80 mg/kg i.p. on day 29 and 30)以及魚針草內酯之低、中及高劑量組(10、25及50 mg/kg b.w.) 以管餵方式連續餵食小鼠30天，評估對體內T及B細胞之免疫毒性作用。第一部分基因毒理試驗結果顯示，不論是否添加S9肝臟代謝酵素，魚針草內酯對沙門氏菌TA102、TA98、TA100、TA1535及TA1537皆不具回復突變性，且對中國倉鼠卵巢細胞也不

具有致變異性。體內試驗結果則顯示魚針草內酯劑量在1000 mg /kg b. w.下，對小鼠週邊紅血球不具染色體基因變異之毒性作用。第二部分為魚針草內酯對大鼠口服急毒性大於1000 mg/kg b.w.，且於魚針草內酯低、中及高劑量組(10、25及50 mg/kg b.w.)對大鼠28天餵食毒性試驗結果顯示均無不良影響。第三部分為小鼠30天免疫毒理試驗，於絕對及相對臟器重量，僅於陽性對照組之脾臟及胸腺重量及百分比有顯著性下降；於淋巴球增殖試驗中，陽性對照組受LPS及ConA刺激之淋巴細胞數量與對照組相比，下降分別為68及34%，而魚針草內酯於低、中及高劑量組對ConA刺激之淋巴細胞數量與對照組

相比，下降24-28%；淋巴增殖上清液IL-5部份，魚針草內酯高劑量組與對照組相比下降4%；於脾臟細胞免疫分型之結果，陽性對照組CD3+及CD4+ (%)則相對明顯上升，上升幅度為39%及35%，於CD45+(%)則下降25%，而魚針草內酯於中及高劑量組對脾臟細胞淋巴球分型CD3+(%)亦有顯著性減少，下降百分比為20%；於免疫組織化學染色法結果顯示，陽性對照組中脾臟及腸繫膜淋巴結CD3+%上升41%及28%，而脾臟及胸腺CD20+(%)下降24%及91%，而魚針草內酯於各劑量組均無明顯差異。綜合以上結果，於三項基因毒理試驗之結果顯示皆為陰性，表示魚針草內酯不具有基因毒性，另外，於口服急毒性試

驗結果得知魚針草內酯對於大鼠口服急毒性劑量大於1000 mg/kg b.w.，且28天重複餵食試驗結果顯示魚針草內酯在最高劑量(50 mg/kg b.w.)對大鼠並無累積性毒害產生。另在免疫毒理試驗中，結果顯示魚針草內酯對小鼠體內B細胞並無不良反應，對T細胞則具有輕微免疫抑制作用，其作用機制仍需進一步探討。

嚴重塑性變形對納米碳化物強化型肥粒鐵鋼之顯微結構與機械性能影響

為了解決BK-S2的問題，作者林美均 這樣論述：

經由界面析出物強化的肥粒鐵鋼已經被發展且應用超過了十年，但僅有少數的文章已發表關於其強變形後的行為現象。本論文主要研究具有奈米等級的析出物之肥粒鐵經過兩種不同處理方式後的微結構變化，其中主要分成兩部分的製程方式：(1)冷壓退火處理 (2)高壓扭轉(1) 冷壓退火處理： 本研究引入經冷壓退火處理後細化晶粒的理論，並透過光學顯微鏡，電子背向繞射(EBSD) ，機械性能則以硬度與拉伸試驗的方式來觀測結果。結果顯示，硬度以及拉伸強度皆隨著退火溫度升高而下降且比原材性質劣化。此外，退火後材料呈現比例低的再結晶度。經由（掃描）穿透式電子顯微鏡的幫助，本研究確認了其析出物的粗化效應造成了冷壓退火後的性

質劣化。再者，經由與IF鋼對比，同時也確認析出物延緩了再結晶的發生，導致再結晶比例下降。(2) 高壓扭轉： 本研究採用3120B材料經高壓扭轉後，透過硬度量測及JeoL JSM-7800F Prime的電子背向繞射(EBSD)來研究其微結構變化。經本研究觀測，此材料需要一定大小的應變量，其硬度才始之劇烈上升。換句話說，當應變量超過某值後，材料才開始改變其微結構造成硬度的上升。根據先前的研究，由於析出物能有效抑制差排的蜂巢狀結構產生，本研究進一步指出，析出物的角色因而延緩了高壓扭轉時的第一步驟（差排的蜂巢狀結構產生），造成材料在第一階段硬度的上升被延後。而當壓延量超過此極值，金相才開始發生晶

粒形貌變化，接著伴隨其他步驟發生。總結來說，與其他鋼鐵與合金相比，具有緻密且細小之碳化物的肥粒鐵鋼有相當多不同的行為結果，而這些不同可以透過其碳化物與差排或晶界的的交互作用所解釋。因此，透過研究缺陷及其動態反應，像壓延與再結晶現象，將讓我們更透測了解材料的性質與微結構。透過本研究的結果則可應用於冷軋帶鋼或是嚴重鍛造成分的發展。